發(fā)布時(shí)間: 2023-06-16 點(diǎn)擊次數: 675次
二代測序(Next-Generation Sequencing,NGS)是指使用高通量平臺同時(shí)對大規模DNA或RNA進(jìn)行快速、準確、低成本的測序技術(shù)。在這個(gè)過(guò)程中,二代測序酶起到了重要作用。
二代測序酶主要分為兩類(lèi):聚合酶和核苷酸轉移酶。
1. 聚合酶
聚合酶是進(jìn)行DNA擴增的關(guān)鍵工具,在PCR (Polymerase Chain Reaction) 過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)重要作用。其中最常見(jiàn)的是Taq DNA polymerase和Phusion DNA Polymerase兩種。
Taq DNA polymerase即熱穩定型聚合酶,能夠耐受較高溫度條件下的反應,并且擴增產(chǎn)物含有A尾巴(Adenines),適用于目標片段長(cháng)度較短且含有AT富集區域時(shí)使用;而Phusion DNA Polymerase則由多個(gè)不同來(lái)源的DNA polymerases組成復雜結構體系,在保證特異性與靈敏度基礎上, 具備更好的擴增效率、精準性及拓展模板長(cháng)度等優(yōu)點(diǎn)。
2. 核苷酸轉移 酶
核苷轉移脫氧核糖體(Nucleotide Transfer and Deoxyribonucleotide Transfer)也稱(chēng)為內切酶,是一類(lèi)蛋白質(zhì)酶,在DNA測序過(guò)程中扮演著(zhù)重要的角色。這些內切酶可以短小地識別和結合到DNA上,并在特定核苷酸位點(diǎn)處水解化學(xué)鍵,釋放出部分堿基或其它標記物。
總之, 二代測序酶作為高通量平臺進(jìn)行快速、準確、低成本的基因組學(xué)研究所必備的關(guān)鍵工具, 具有極其重要和不可替換的作用。